1526年明朝时期,刺客少芸(Shao Jun)返回中国,向两年前剿灭了刺客组织的圣殿骑士八虎宦官展开复仇。以意大利刺客大师埃齐欧·奥迪托雷(Ezio Auditore de Firenze)赠予之“先行者之盒”(Precursor Box)为饵,少芸故意被俘并杀死了高凤。少芸逃出禁锢后与刺客大师王守仁会合后奉命前往澳门,于码头区刺杀了谷大用亦夺回盒子。丘聚获悉后火烧码头报复但少芸已成功逃脱。1529年,少芸前往南安刺杀魏彬,同时八虎之首张永杀害了王守仁,先行者之盒再次落入圣殿骑士团手上。1530年,少芸获旧识兼嘉靖帝第二任皇后张皇后邀请到紫禁城会面,发现丘聚与张永威胁张皇后设下陷阱。张永离开后少芸与丘聚进行交战,期间一灯笼掉到地上造成大火,少芸杀死丘聚后逃离陷入火海的皇宫。1532年,张永已把先行者之盒送离中国并欲开放万里长城让俺答汗领兵入侵,少芸关闭长城[18]后乘蒙古军队炮击城墙时追上并刺杀张永。1567年,已重建了刺客组织的少芸以长生不死药暗杀了嘉靖帝。